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Investigación

Serología

Líneas de investigación

Contenidos con Investigacion Inmunobiología .

El grupo de Inmunobiología lleva años trabajando en las siguientes líneas de investigación:

1) Los mecanismos de generación de células hematopoyéticas a lo largo de la ontogenia y en la influencia que las primeras células hematopoyéticas ejercen sobre el sistema inmunitario, innato y adaptativo, presente en el individuo adulto. Hemos identificado y caracterizado una nueva población de linfocitos B denominados B1-Rel (B220lo), que producen altos niveles de anticuerpos naturales IgG/IgA. Intentamos entender su papel en la respuesta inmune en modelos animales de infección, analizando su impacto sobre las poblaciones celulares inmunitarias y sobre la producción de mediadores solubles (citoquinas e inmunoglobulinas). En relación con esta temática hemos evaluado la generación de los megacariocitos embrionarios (y sus nichos de diferenciación), su funcionalidad y de las plaquetas, y su influencia en el desarrollo hematopoyético. En cuanto a las poblaciones linfoides, hemos llevado a cabo una caracterización extensa por citometría de flujo y por la metodología de secuenciación de RNA de célula única (scRNAseq). Para la realización de estos estudios celómicos hemos diseñado de paneles complejos para su utilización en el análisis fenotípico multiparamétrico, y tecnologías ómicas de citometría de célula única y RNAseq sobre poblaciones celulares purificadas.

En paralelo, nos interesa entender las respuestas inmunitarias locales en infecciones respiratorias en momentos de especial susceptibilidad por fragilidad del sistema inmunitario (la infancia y la vejez), tanto en modelos animales de ratón, que permiten su manipulación, como en seres humanos. 

 

2) Modelos de ratón estudiados durante la vida neonatal, en los que evaluamos el efecto del tratamiento con antibióticos (AB) y abordamos el papel de receptores TLR en las poblaciones celulares inmunitarias de tipo innato, pseudoinnato y adaptativas. En estos modelos observamos que la administración de AB era capaz de modular las poblaciones linfoides B, así como su capacidad de secretar en cultivo citoquinas proinflamatorias y su diferenciación hasta células plasmáticas, con repertorios de inmunoglobulinas diferenciados. Además. Estos efectos eran mediados a través del receptor Toll-like-2 (TLR2).

3) Modelos de ratón con senescencia acelerada (SAMP8) y animales senescentes (mayores de 20 meses de edad) para trazar las poblaciones linfoides y mediadores solubles de la repuesta inmunitaria (inmunoglobulinas y citoquinas). En estos modelos se observa que las poblaciones B linfoides (B1Rel y linfocitos B de zona marginal) están alteradas, acompañándose de un aumento de IgG1 con gran restricción de sus repertorios VDJ.


4) Papel de la población B1Rel en modelos animales de infección local o sistémica. Analizamos la respuesta frente a Streptoccoccus pneumoniae (SPN) a nivel local en el pulmón y a nivel sistémico en el bazo, así como el papel de TLR4 en estas respuestas

5) En humanos estamos estudiando las respuestas inmunitarias en niños con primoinfección viral por virus respiratorio sincitial (VRS). En este caso estudiamos la respuesta inmunitaria que se produce localmente en la mucosa nasal (mediante el análisis de lavados nasales, LN) en una cohorte de niños infectados frente a controles sanos, estratificados por edad. Hemos encontrado que en estos LN se acumulan células linfomieloides en los pacientes con poblaciones diversas de linfocitos, así como citoquinas e inmunoglobulinas.

6) Análisis y caracterización de las vesículas extracelulares que se producen durante la infección respiratoria tanto en sobrenadantes de pulmón de los modelos de infección por SPN, como en los LN en el caso de los niños con infección por VRS.

7) En paralelo llevamos a cabo estudios de los reordenamientos genéticos de las inmunoglobulinas y su utilización en la generación de receptores quiméricos para su posible uso en inmunoterapia. 

Proyectos de investigación

Contenidos con Investigacion Inmunobiología .

-Proyecto “Inducción, diferenciación y modulación de linfocitos B residentes en el pulmón en respuesta a neumococo (NEUBLUNG)”. Ministerio de Ciencia e Innovación, PID2022-141754OB-I00 Convocatoria 2022 «Proyectos de Generación de Conocimiento». 01/09/2023-31/08/2026. Financiado por MICIU/AEI /10.13039/501100011033 y por FEDER, UE. IP: Belén de Andrés Muguruza. CoIP: María Luisa Gaspar Alonso-Vega.


 

-Proyecto.” Respuesta inmunitaria de la mucosa nasal en la bronquiolitis infantil” Instituto de Salud Carlos III-AESI. AESI-PI22CIII/00030 IP: Belén de Andrés Muguruza. CoIP Maria Luisa Gaspar Alonso-Vega. 01/01/2023-31/12/2025..

-Proyecto. BenBedPhar. CA20121, Unión Europea. Antonio Cuadrado. (CNM-ISCIII).19/10/2021-18/10/2025.

-Proyecto Asociación Española Contra el Cáncer “Novel comprehensive immunotherapy to specifically target the malignant clone in Sézary syndrome, an ultra-rare cancer of mature T lymphocytes”, nº PROYE20084REGU. IP: José Ramón Regueiro, IP grupo Maria Luisa Gaspar. 01/01/2021-31/12/2023. 

Proyecto “El sistema inmunitario pulmonar en homeostasis e infección: caracterización y función de poblaciones linfoides inmaduras y pseudoinnatas”. MINECO-RETOS RTI2018-099114-B-100. IP: Maria Luisa Gaspar, CoIP Belén de Andrés 01/01/2019-31/12/2022. Financiado por MICIU/AEI /10.13039/501100011033/ y por FEDER Una manera de hacer Europa.


 

-Proyecto ”Nuevas poblaciones linfoides B: Células pseudoinnatas B1-rel, mantenimiento homeostático y su respuesta en condiciones de infección”. MINECO-RETOS SAF2015-70880-R. IP: Maria Luisa Gaspar. 01/01/2016-31/12/2019. 


 

-Proyecto “Papel de los linfocitos CD19+CD45R- en las respuestas inmunes perinatales. Implicaciones relacionadas con enfermedades respiratorias en neonatos”. AESI PI14CIII/00049; IP Belén de Andrés. 2015-2018. 

-Proyecto “Estudio de la poblacion pseudo-innata de linfocitos B CD19+CD45R- en modelos de infeccion TLR-dependientes”. AESI PI11/01733FIS. IP Belén de Andrés. 2012-2015. 

-Proyecto.” Interacciones celulares en el establecimiento de nichos de diferenciación linfoide B: papel de los megacariocitos y sus implicaciones en patología”. MINECO; SAF2012-33916. Maria Luisa Gaspar. 01/01/2013-31/12/2015.


 

-Proyecto Plataformas ISCIII de apoyo a la I+D+I en Biomedicina y Ciencias de la Salud. PT23CIII/00006. 2023.  Investigadora participante: Isabel Cortegano.

-Contratos de investigación entre el Instituto de Salud Carlos III e Inmunotek S.L. para el desarrollo del estudio Bactek-mv130 y Uromune-MV140 en la protección frente a infecciones por S. pneumoniae. Inmunotek. IP: Belen de Andrés 2019-2021.

-Contrato de investigación entre el Instituto de Salud Carlos III e Inmunotek S.L. “MV130 como modelo de vacuna basada en inmunidad entrenada frente a infecciones respiratorias por neumococo y virus respiratorio sincitial”, Convocatoria CAM. Doctorados Industriales. IND2023/BMD-27071. IP: Belén de Andrés Muguruza. 01/12/2023-30/11/2026. 

Publicaciones destacadas

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Metabolic Profiling at COVID-19 Onset Shows Disease Severity and Sex-Specific Dysregulation FRONTIERS IN IMMUNOLOGY.

3 Ceballos, Francisco C.; Virseda-Berdices, Ana; Resino, Salvador; et al; Jimenez-Sousa, Maria Angeles. (19/19). 2022. Metabolic Profiling at COVID-19 Onset Shows Disease Severity and Sex-Specific Dysregulation FRONTIERS IN IMMUNOLOGY. ISSN 1664-3224.

Metabolomic changes after DAAs therapy are related to the improvement of cirrhosis and inflammation in HIV/HCV-coinfected patients.

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7 Brochado-Kith, Oscar; Martinez, Isidoro; Berenguer, Juan; et al; Jiménez-Sousa, Maria Angeles (‡, AC); Resino, Salvador (‡, AC). (13/13). 2021. HCV Cure With Direct-Acting Antivirals Improves Liver and Immunological Markers in HIV/HCV-Coinfected Patients FRONTIERS IN IMMUNOLOGY. 12:723196. ISSN 1664-3224.

Plasma miRNA profile at COVID-19 onset predicts severity status and mortality

3. Fernández-Pato A; Virseda-Berdices A; Resino S; et al; Fernández-Rodríguez A (AC). (20/20). 2022. Plasma miRNA profile at COVID-19 onset predicts severity status and mortality Emerging Microbes and Infections. Taylor & Francis Online. ISSN 2222-1751.

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Diagnostic Performance of the HCV Core Antigen Test To Identify Hepatitis C in HIV-Infected Patients: a Systematic Review and Meta-Analysis

4. Sepúlveda-Crespo D; Treviño-Nakoura A; Bellon JM; Jiménez-Sousa MA; Ryan P; Martínez I; Fernández-Rodríguez A (AC); Resino S. (7/8). 2022. Diagnostic Performance of the HCV Core Antigen Test To Identify Hepatitis C in HIV-Infected Patients: a Systematic Review and Meta-Analysis.Journal of clinical microbiology. pp.e0133122. ISSN 0095-1137.

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Metabolic Profiling at COVID-19 Onset Shows Disease Severity and Sex-Specific Dysregulation

6. Ceballos FC; Virseda-Berdices A; Resino S; et al; Jiménez-Sousa MÁ (AC). (19/19). 2022. Metabolic Profiling at COVID-19 Onset Shows Disease Severity and Sex-Specific Dysregulation.Frontiers in immunology. 13, pp.925558. WOS (78)

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Novel genes and sex differences in COVID-19 severity

7. Cruz R; Almeida SD; Heredia ML; et al; Fernández-Rodríguez A; Carracedo Á. (51/168). 2022. Novel genes and sex differences in COVID-19 severity. Human molecular genetics. ISSN 0964-6906.

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8. Valle-Millares D; Brochado-Kith O; Martín-Carbonero L; et al; Fernández-Rodríguez A (AC). (22/22). 2021. Different HCV exposure drives specific miRNA profile in PBMCs of HIV patients Biomedicines. MDPI. 9-11, pp.1627.

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9. Ceballos F; Ryan P; Blancas R; et al; Fernández-Rodríguez A (AC); Jiménez-Sousa MA. (19/20). 2021. Are Reduced Levels of Coagulation Proteins Upon Admission Linked to COVID-19 Severity and Mortality? Frontiers in Medicine. Frontiers. 8-718053.

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12 . Molina-Carrión S; Brochado-Kith, Oscar; González-García J; et al; Angeles Jimenez-Sousa, Maria. (16/16). 2020. Telomere length increase in HIV/HCV-coinfected patients with cirrhosis after HCV eradication with direct acting antivirals. JOURNAL OF CLINICAL MEDICINE. MDPI. ISSN 2077-0383.

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15. Brochado-Kith, Oscar; Gomez-Sanz, Alicia; Real LM; et al; Fernandez-Rodriguez, Amanda (AC). (16/16). 2019. MicroRNA Profile of HCV Spontaneous Clarified Individuals, Denotes Previous HCV Infection JOURNAL OF CLINICAL MEDICINE. MDPI. 7. ISSN 2077-0383.

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PUBMED DOI

Listado de personal

Información adicional

El Laboratorio de Serología tiene como principal objetivo la prestación de servicios a centros del Sistema Nacional de Salud, a través de la oferta en la cartera de servicios del Centro Nacional de Microbiología, en la realización de diagnóstico y referencia mediante la detección de anticuerpos, tanto para el diagnóstico primario como para actividades de referencia.

Para esto dispone de las metodologías serológicas adecuadas, gran parte de ellas acreditadas por ENAC de acuerdo con la norma ISO15189. Realiza estudios de validación de ensayos mediante convenios de colaboración con entidades privadas. 

Participa en estudios de seroprevalencia, realizados mediante encomiendas de gestión con el Ministerio de Sanidad y con las autoridades de Salud Pública de diferentes comunidades autónomas.

Por otra parte, participa en proyectos de investigación en relación con las enfermedades infecciosas, en los últimos años sobre enfermedades neurológicas, sobre enfermedades emergentes y sobre los virus incluidos en la vacuna triple vírica.

El Laboratorio de Serología tiene como principal objetivo la prestación de servicios a centros del Sistema Nacional de Salud, a través de la oferta en la cartera de servicios del Centro Nacional de Microbiología, en la realización de diagnóstico y referencia mediante la detección de anticuerpos, tanto para el diagnóstico primario como para actividades de referencia.

Para esto dispone de las metodologías serológicas adecuadas, gran parte de ellas acreditadas por ENAC de acuerdo con la norma ISO15189. Realiza estudios de validación de ensayos mediante convenios de colaboración con entidades privadas. 

Participa en estudios de seroprevalencia, realizados mediante encomiendas de gestión con el Ministerio de Sanidad y con las autoridades de Salud Pública de diferentes comunidades autónomas.

Por otra parte, participa en proyectos de investigación en relación con las enfermedades infecciosas, en los últimos años sobre enfermedades neurológicas, sobre enfermedades emergentes y sobre los virus incluidos en la vacuna triple vírica.

El centro está dirigido por el Dr. José Miguel Rubio Muñoz.

El Dr. José Miguel Rubio es licenciado en Ciencias Biológicas por la Universidad Autónoma de Madrid (1986) y doctor en Ciencias Biológicas por la misma universidad (1992). Realizó su tesis doctoral en el Departamento de Genética de la Universidad Autónoma de Madrid, en calidad de Profesor Asociado de Universidad (1988-1989), y en la Facultad de Biología de la Universidad de East Anglia en Norwich, Reino Unido, como Senior Research Assistant (1989-1992).
Durante su etapa postdoctoral obtuvo una Beca de la Comisión Europea dentro del Programa Human Capital and Mobility  a desarrollar en la Universidad de “La Sapienza” de Roma, Italia y el Instituto de Biología Molecular y Biotecnología en Creta, Grecia (1993-1994). Con posterioridad realizó una nueva estancia subvencionada por la OMS y la propia universidad en el departamento de Entomología de la Universidad de Wageningen, Países Bajos (1994-1996).

Desde 1997 es miembro del Instituto de Salud Carlos III (ISCIII), donde se incorpora al Departamento de Parasitología del Centro Nacional de Microbiología, como postdoctoral UE-INCO y posteriormente con una beca de la Comunidad Autónoma de Madrid (CAM). Formo parte del grupo fundador del Centro Nacional de Medicina Tropical (2003-2006)  y de la Unidad de Alertas y Emergencias 24/7 (2006-2018) y actualmente es Responsable de la Unidad de Malaria y Parasitosis Emergentes del Centro Nacional de Microbiología y forma parte, como personal investigador, del Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Infecciosas (CIBERINFEC/ISCIII).

En su carrera científica ha sido Científico Visitante del Centro Leonidas e Marie Dean (FIOCRUZ-AMAZONAS, Manaos, Brasil) y es Consultor Externo de los Departamentos de Parasitología de la Universidad del Cairo (Egipto) y del Centro de Investigación Médica (MRC) de Kuala Lumpur (Malasia).  Además, pertenece o ha pertenecido a diferentes comités nacionales e internacionales:  Miembro del grupo de expertos para el control de malaria del Centro de Control de Enfermedades Europeo (ECDC) desde 2011; Experto-Evaluador para los programas de salud de la Comisión Europea desde 2004; Representante español (comisionado por el ISCIII y el MSC) en el Comité Científico Técnico del TDR (OMS) 2007-2008; Adjunto Focal Point  español para microbiología en el Centro de Control de Enfermedades Europeo (ECDC) desde 2012 hasta 2020; y, miembro del Comité de Ética para la Investigación del ISCIII hasta 2019.

En este periodo ha publicado más de 100 artículos en revistas indexadas internacionales, 10 capítulos de libros y ha sido coeditor de dos libros dentro del área de malaria, medicina tropical y enfermedades olvidadas. Ha participado en 58 proyectos de investigación de financiación competitiva, 20 de ellos internacionales, habiendo sido el investigador principal en 8 nacionales y en 11 internacionales como IP del proyecto o líder de WP. Además, ha dirigido cinco convenios con empresas. Actualmente tiene concedidos cuatro sexenios de investigación, presentándose este año 2025 al quinto. En el ámbito docente participa en distintos programas de postgrado en las áreas de microbiología y parasitología, habiendo dirigido siete tesis doctorales y más de 20 trabajos fin de Master o Grado, tanto a nivel nacional como internacional. 

El laboratorio de Referencia e Investigación en Resistencia a Antibióticos ofrece una amplia cartera de servicios al Sistema Nacional de Salud, las cuales pueden solicitarse en cnm-laboratorios.isciii.es. Jefe del Laboratorio: Jesús Oteo Iglesias (Punto focal Nacional de Resistencia antibiótica).

Dispone de dos programas de Vigilancia oficiales y gratuitos que engloban los ensayos ofertados ya sea como aislamientos individuales o mediante estudio de brotes. El Laboratorio utiliza asimismo técnicas de PCR en tiempo real para la detección de genes de resistencia, estas técnicas se han adaptado a un formato multiplex que permite detectar varios genes en la misma reacción. En los últimos años se han incluido metodologías basadas en la secuenciación de genomas completos para el análisis de bacterias multiresistentes (WGS).

Programa de vigilancia de Haemophilus influenzae. Responsables: María Pérez Vázquez (Punto focal Nacional de Haemophilus influenzae) y Belén Aracil. Laboratorio encargado de la identificación, estudio de sensibilidad y análisis genotípico de aislados de Haemophilus influenzae, centrándose esencialmente en la patología invasiva debida este patógeno. 

Programa de vigilancia de Resistencia a Antibióticos. Responsables: María Pérez Vázquez  y Belén Aracil (Punto focal Nacional de Resistencia antibiótica). Laboratorio encargado de la identificación, el estudio de sensibilidad antibiótica, y el diagnóstico fenotípico y genotípico de los diferentes mecanismos de resistencia a antibióticos fundamentalmente en enterobacterias y gram-negativos no fermentadores y Enterococcus spp.

Estudio de brotes. Responsables: Belén Aracil y María Pérez Vázquez. El programa incluye la caracterización de brotes nosocomiales y clones emergentes de alto riesgo mediante diferentes técnicas moleculares (tabla resumen). Éstas, nos permiten realizar estudios filogenéticos con el fin de obtener una información detallada acerca la relación entre los diferentes aislados y su trazabilidad. El objetivo final es generar datos que se transfieren a los hospitales como ayuda para la prevención o control de la propagación del brote.

Acreditación y Calidad. Responsable: Belén Aracil. El laboratorio Referencia e Investigación en Resistencia a Antibióticos ha sido de los primeros en el ISCIII en la utilización de técnicas acreditadas por la Entidad Nacional de Acreditaciones (ENAC). Este laboratorio consiguió la primera acreditación homologada de técnicas diagnósticas en 2012, programa que ha sido ampliado, de manera que en la actualidad más de la mitad de las técnicas ofrecidas al Sistema Nacional de Salud están debidamente acreditadas por ENAC.

Técnicos responsables de las técnicas realizadas en el Laboratorio: Noelia Lara Fuella y Verónica Bautista Sánchez.

En la siguiente imagen se resumen las técnicas ofrecidas al Sistema Nacional de Salud.

PROGRAMAS NOMBRE CARTERA SERVICIO PATÓGENO DETERMINACIÓN, DETECCIÓN, ANÁLISIS MÉTODOS

Programa de vigilancia de Haemophilus

Programa de vigilancia de resistencia a antibióticos.

Identificación bacteriana

Haemophilus sp.

Enterobacterias, gram-negativos no fermentadores, Enterococcus spp

Identificación bacteriana

Bioquímicos

MALDI TOF

Secuenciación de RNAr

Identificación capsular

Haemophilus influenzae

 

Identificación capsular fenotípica y genotípica

Aglutinación serológica en latex

PCR ind/multiplex

Determinación de Sensibilidad

Haemophilus sp.

Enterobacterias, gram-negativos no fermentadores, Enterococcus

 

Determinación de Sensibilidad

Microdilución                

Tiras epsilon               

Kirby Bauer

Métodos fenotípicos de detección de mecanismos de resistencia

Enterobacterias, gram-negativos no fermentadores,

 

Métodos fenotípicos de detección de mecanismos de resistencia

Discos y tabletas combinados con inhibidores                

Tiras combinadas     

Test de Hodge modificado

CabaNP                               

Inmunocromatografía CBP

Métodos genotípicos de detección de mecanismos de resistencia

Haemophilus sp.

Enterobacterias, gram-negativos no fermentadores, Enterococcus

 

ADN, PCR y secuenciación

PCR ind/multiplex

Análisis comparativo de las secuencias

Tipificación molecular/análisis filogenéticos

Haemophilus sp.

Enterobacterias, gram-negativos no fermentadores, Enterococcus

 

Corte enzimas de restricción, electroforesis

ADN, PCR y secuenciación

Preparación de librerías y secuenciación y análisis de genomas completos

 

PFGE

 

MLST

 

WGS